Реферат по микробиологии на тему оценка жизнеспособности микроорганизмов в лекарственной форме (стерильность, МБЧ) методов проточной цитометрии

ПЦ – это мощный инструмент, который не ограничивается только анализом клеток человека.
В последнее время в микробиологии, благодаря развитию методов молекулярной диагностики, таких как полимеразноцепная реакция (ПЦР), FISH и секвенирование, возросла необходимость в качественной и количественной характеристике отдельных микробных клеток. Это привело к появлению новых применений ПЦ в этой области [1].
Первоначально ПЦ использовалась для обнаружения Escherichia coli в образцах крови с высокой чувствительностью (10 клеток/мл). Однако до середины 90-х годов прошлого века работы по применению ПЦ в микробиологии были единичными. Первые успешные примеры использования ПЦ появились в промышленной и водной микробиологии [7].
Тем не менее, отсутствие стандартизированных процедур и однозначных методов интерпретации результатов до сих пор препятствует широкому внедрению ПЦ в клиническую микробиологию.
Одним из преимуществ ПЦ является возможность прямого подсчёта количества микробных клеток в культуральной среде. В то время как классический нефелометрический метод предоставляет лишь полуколичественные данные, а оптический анализ – точные количественные характеристики, ПЦ уже успешно применяется для анализа питьевой и сточной воды в санитарной практике [6].
Точность количественного подсчёта с помощью ПЦ зависит от технических характеристик используемого оборудования и морфологических особенностей клеток, что требует дальнейшей стандартизации.
Несомненным достоинством прямого подсчёта микробных клеток методом ПЦ является его независимость от способности к культивированию. Этот метод применим для определения количества термофилов, олиготрофов и автотрофов в среде. По сравнению с микроскопией, ПЦ характеризуется меньшей трудоёмкостью, высокой скоростью и возможностью выявления минимальных концентраций микроорганизмов (103-104 клеток/мл) в водной среде.
Способность ПЦ выявлять различные физиологические состояния микробных клеток приобретает особое значение при оценке их жизнеспособности. Область применения этой возможности весьма широка: от клинической практики и промышленной микробиологии до научных исследований.
В работе [5] представлен метод оценки жизнеспособности пробиотических бактерий Lactococcus /Lactobacillus с использованием ПЦ.
Применение флуоресцентных красителей SFDA/TOTO позволило добиться наилучшей дифференциации между живыми и мертвыми клетками. Полученные результаты полностью соответствуют данным, полученным классическими методами. Предлагаемый метод может быть использован в пищевой и фармацевтической промышленности
Несмотря на успехи в разработке и исследовании проточной и твердофазной цитометрии, их широкое применение в фармацевтическом анализе ограничено методическими и экономическими трудностями [3].