Контрольная работа по биотехнологии на тему Биотехнология растений

Получение растений с увеличенным содержанием витамина А (биофортификация)
Разработать рис (Золотой рис), обогащённый провитамином А (β-каротином).
1. Определение метаболического пути:
- Путь биосинтеза β-каротина включает синтез из лецитина через каротиноидный путь.
2. Выбор генов:
- Ген psy (phytoene synthase) из maize (кукуруза) для катализирования первого шага биосинтеза β-каротина.
- Ген crtI (carotenoid isomerase) из pseudomonas для повышения эффективности конверсии фитоена в бета-каротин.
3. Конструирование вектора:
Какой промотор для экспрессии в зерне будете использовать - использование промотора OsPhyA для экспрессии в зерне риса, который специализирован для тканей зерна.
4. Метод трансформации:
- Agrobacterium-опосредованная трансформация и использование метода пневмопередачи (пухи).
5. Анализ и селекция:
Какой метод используете для отбора линий с максимальной продукцией β-каротина.
- Используется метод HPLC (жидкостная хроматография с обратной фазой) для отбора линий с максимальной продукцией β-каротина.

6. Оценка биодоступности и стабильности:
o Проведение КАКИХ экспериментов на животных моделях необходимо.
- Проведение токсикологических экспериментов на животных моделях и оценка метаболизма β-каротина в организме.

Задача 2. Восстановление вида через культуру тканей
Редкий вид орхидеи находится на грани исчезновения. Необходимо увеличить численность популяции методом in vitro.
1. Сбор биоматериала:
- Сбор семян из зрелых коробочек орхидеи в естественных условиях.
2. Асептическое проращивание (с указанием условий):
Семена высеваются на среду MS (Murashige and Skoog) с добавлением сахарозы и агар-агара, инкубация при 25°C с 16-часовым светом.
3. Индукция каллусной стадии (с указанием условий):
Перенос проростков на среду с фитогормонами ? 2,4-D и BA для стимуляции роста каллуса, температура 24°C и световой режим 16/8 ч.
4. Органогенез (с указанием условий):
- Использование среды с высоким содержанием BA (бензиламинопурин) для индукции формирования зачатков побегов.
5. Укоренение (с указанием условий):
- Пересаживание побегов на среду с IBA (индол-3-бутировая кислота) для укоренения при условиях 24°C и в темноте.
6. Акклиматизация (с указанием условий):
- Пересадка укоренившихся растений в смесь торфа и перлита, постепенное уменьшение влажности в теплице, в условиях 20-25°C.
7. Условия мест обитания и мониторинг:
- Условия полива и освещения в естественных условиях, контроль состояния растений и их адаптации к среде обитания в течение 1-2 лет.